日時：	2018年10月12日 16:00～17:15
場所：	京都大学 ウイルス・再生医科学研究所 3号館（旧再生医科学研究所　東館）5階ルーフテラス
演者：	清成　寛　博士 ( 理化学研究所生命機能科学研究センター 生体モデル開発ユニット　ユニットリーダー)
演題：	CRISPR/Cas9による遺伝子改変マウス作製法の最適化

講演要旨

CRISPR/Cas9システムによるゲノム編集技術により、マウス受精卵そのものの遺伝子改変が可能となり、従来のES細胞を用いたジーンターゲティング法に比べ、安価で、かつ、短期間で遺伝子改変マウスを作製することが可能となった。我々は本技術を導入して以来、凍結受精卵を用いた遺伝子改変マウス（ノックアウト（KO）マウス、conditional KOマウス、ノックイン（KI）マウスなど）作製法の最適化を行ってきた。

KOマウスやssODNを用いたloxP配列の挿入によるconditional KOマウスの作製については、簡便かつ効率的な方法として知られるエレクトロポレーション法（Hashimoto 2016）を用いて作製を進めてきており、その効果的な作製方法について報告する。

一方で、KIマウスの作製効率については、KOマウスと比較すると依然として低く、その効率を高めるための多くのアプローチが報告されてきた。我々はこれまでに報告された3つの方法（１）Homologous recombination-based method、（2) Microhomology-mediated end joining-based method (Sakuma 2015)、（3) homology-mediated end joining-based method (Yao 2017)について、ROSA26遺伝子座へのGFPカセットのKI効率を比較、検討することにより、KIマウス作製法の最適化を行い、高い効率でKIマウスを作製することに成功している。

本発表ではCRISPR/Cas9システムを用いた最適な遺伝子改変マウス作製方法について、我々の検証結果と共に紹介する。

(言語：日本語　/ Language：Japanese)

 

 

主　催	京都大学ウイルス・再生医科学研究所
連絡先	附属感染症モデル研究センター（TEL:075-751-4793）